劉建榮課題組在FLI1 介導(dǎo) PART1 在胚胎反復(fù)種植失敗中的功能與機制研究中取得進展
體外受精-胚胎移植（IVF-ET）是治療不孕癥最常見、最有效的方法。然而，一些不孕患者仍然經(jīng)歷反復(fù)種植失敗（RIF）。RIF病因復(fù)雜，包括胚胎質(zhì)量不佳、宮腔環(huán)境異常、內(nèi)分泌和免疫因素等。其中，子宮內(nèi)膜容受性低是主要原因，約2/3的胚胎種植失敗是由此引起。近年來，研究主要關(guān)注子宮內(nèi)膜細胞的信號蛋白異常對胚胎植入的調(diào)控機制，但子宮內(nèi)膜容受性異常的發(fā)病機制尚未完全闡述清楚。探索介導(dǎo)RIF異常轉(zhuǎn)錄的關(guān)鍵調(diào)控因子對于揭示RIF的分子機制和臨床治療提供新思路，具有重要意義。
山西醫(yī)科大學(xué)第五臨床醫(yī)學(xué)院劉建榮教授課題組在PeerJ期刊發(fā)表了題為“Overexpression of FLI1 promote PART1 transcription in the endometrial epithelial cells contributing to reduced endometrial receptivity and embryo implantation failure”的研究論文。在該課題的研究中，研究人員鑒定出了調(diào)控RIF低內(nèi)膜容受性的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，并闡明了關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子FLI1在RIF中的作用與調(diào)控機制，從而揭示RIF低子宮內(nèi)膜容受性的內(nèi)在分子機制，尋找到了治療RIF低子宮內(nèi)膜容受性的潛在靶點，有望為RIF的防治提供新策略。該研究的主要發(fā)現(xiàn)如下：
第一部分：鑒定了RIF低內(nèi)膜容受性中發(fā)揮重要功能的細胞群及關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子
基于scATCA-seq構(gòu)建RIF患者黃體期子宮內(nèi)膜組織的單細胞染色質(zhì)可及性圖譜，鑒定到子宮內(nèi)膜上皮細胞是調(diào)控RIF低內(nèi)膜容受性的關(guān)鍵細胞群；進一步結(jié)合RT-qPCR技術(shù)，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄因子FLI1在RIF子宮內(nèi)膜上皮細胞中染色質(zhì)可及性增強，且FLI1在RIF子宮內(nèi)膜上皮細胞中顯著上調(diào)，提示FLI1參與了RIF過程。
子宮內(nèi)膜組織中單細胞聚類分析與鑒定
FLI1在RIF患者的子宮內(nèi)膜上皮細胞中異常上調(diào)
第二部分：研究了關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子FLI1在胚胎種植失敗低內(nèi)膜容受性中的作用
RT-qPCR技術(shù)檢測FLI1在容受性子宮內(nèi)膜上皮細胞系和非容受性內(nèi)膜上皮細胞系中的表達水平變化，發(fā)現(xiàn)FLI1在非容受性內(nèi)膜上皮細胞系中的表達水平顯著高于容受性子宮內(nèi)膜上皮細胞系；在細胞水平實驗揭示，過表達FLI1抑制子宮內(nèi)膜上皮細胞增殖、遷移、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和胚胎粘附，而沉默F(xiàn)LI1則發(fā)揮相反功能；同時，在動物水平實驗揭示，子宮內(nèi)膜上皮細胞過表達FLI1可以顯著抑制小鼠胚胎著床。
FLI1對子宮內(nèi)膜上皮細胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響
第三部分：揭示了上皮細胞過表達FLI1導(dǎo)致胚胎植入失敗的內(nèi)在分子機制
通過lncRNA數(shù)據(jù)挖掘、生物信息學(xué)分析以及在體實驗鑒定到PART1是調(diào)控胚胎植入的關(guān)鍵lncRNA；通過轉(zhuǎn)錄因子-lncRNA結(jié)合能力與位點預(yù)測、ChIP-qPCR、雙熒光素酶報告實驗綜合分析，揭示在子宮內(nèi)膜上皮細胞中FLI1結(jié)合在PART1啟動子上促進PART1轉(zhuǎn)錄表達；體外細胞水平設(shè)計的挽救實驗證明，F(xiàn)LI1通過上調(diào)PART1表達抑制子宮內(nèi)膜上皮細胞增殖、遷移、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和胚胎粘附。
蛋白質(zhì)印跡法檢測PART1參與了FLI1對子宮內(nèi)膜上皮細胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的抑制作用
總之，該研究發(fā)現(xiàn)了FLI1在RIF子宮內(nèi)膜上皮細胞中顯著上調(diào)，參與了RIF過程，并進一步闡明了FLI1在胚胎植入中的作用及其分子機制。
山西醫(yī)科大學(xué)張軼樂博士（現(xiàn)為鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院生殖與專科醫(yī)院副院長，教授）為本文第一作者，山西醫(yī)科大學(xué)第五臨床醫(yī)學(xué)院劉建榮教授為本文的通訊作者。該研究工作得到國家自然科學(xué)基金委員會的經(jīng)費資助。
